mPAGE® Lux工作流程

圖1. 傳統(tǒng)制膠工作流程與mPAGE® Lux對(duì)比。相對(duì)于傳統(tǒng)制膠技術(shù)，mPAGE® Lux制膠系統(tǒng)總步驟更少、聚合時(shí)間更短、有毒廢棄物更少。mPAGE® Lux制膠系統(tǒng)制得的凝膠兼容mPAGE® 小型膠槽和Bio-Rad Mini-PROTEAN電泳槽。為實(shí)現(xiàn)非凡的分離度并縮短跑膠時(shí)間，請(qǐng)使用mPAGE® 緩沖液。Lux凝膠兼容Bis-Tris適用的緩沖液和染色試劑。

圖2. mPAGE® Lux Bis-Tris凝膠和手制tris-甘氨酸凝膠的數(shù)據(jù)質(zhì)量對(duì)比。mPAGE® Lux Bis-Tris凝膠（左）和手制tris-甘氨酸凝膠（右）的條帶質(zhì)量對(duì)比。兩種凝膠都是10%丙烯酰胺，上樣A431人類(lèi)細(xì)胞裂解物滴定液。電泳運(yùn)行時(shí)間200V 下為 42 分鐘（Lux 凝膠），120V 下為119分鐘（tris-甘氨酸凝膠）。凝膠采用ReadyBlue™考馬斯凝膠染色劑染色。

圖3. 濕法、快速和半干法轉(zhuǎn)印方法蛋白質(zhì)印跡對(duì)比。對(duì)比采用12% mPAGE® Lux Bis-Tris凝膠，上樣A431人細(xì)胞裂解物滴定液，通過(guò)各種轉(zhuǎn)印方法轉(zhuǎn)印到Immobilon® -P膜上。使用抗EGFR和抗ErK1/2 抗體轉(zhuǎn)印膜，然后使用Immobilon® ECL Ultra Western HRP底物進(jìn)行檢測(cè)。Turbo 方法 = 使用Bio-Rad Trans-Blot® Turbo™轉(zhuǎn)印系統(tǒng)和Trans-Blot® Turbo™轉(zhuǎn)印套裝進(jìn)行轉(zhuǎn)印。

圖4. mPAGE® Lux Bis-Tris凝膠的重現(xiàn)性。A. 制備四份8%凝膠并上樣A341人細(xì)胞裂解物滴定液，隨后用ReadyBlue™考馬斯凝膠染色劑染色。B. 計(jì)算每份凝膠未染色分子量標(biāo)記的相對(duì)遷移距離 (Rf)。揭示每個(gè)蛋白質(zhì)條帶的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

圖5. mPAGE® Lux Bis-Tris試劑保質(zhì)期分析。mPAGE® Lux Bis-Tris制膠使用試劑(A) 0 個(gè)月、(B) 6個(gè)月或(C) 12 個(gè)月。運(yùn)行模式或運(yùn)行時(shí)間上未觀測(cè)到差異。