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TransIT®-Lenti Transfection Reagent

更新時間:2016-11-24

簡要描述:

【Mirus新品*】
Mirus公司新推出轉(zhuǎn)染試劑TransIT®-Lenti Transfection Reagent,該產(chǎn)品適用于將載體轉(zhuǎn)染至貼壁的HEK 293T細(xì)胞中,可提高轉(zhuǎn)染效率,增加重組慢病毒產(chǎn)量。

產(chǎn)品特點:
高性能——高達(dá)八倍的功能性滴度
操作簡便——無需更換培養(yǎng)液基
無動物源性成分——安全可靠

型號:MIR6603/6604/6600廠商性質(zhì):代理商瀏覽量:1653

 

TransIT®-Lenti Transfection Reagent

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【Mirus新品*】TransIT®-Lenti Transfection Reagent——重組慢病毒生產(chǎn)的理想選擇

 

 

Mirus公司新推出轉(zhuǎn)染試劑TransIT®-Lenti Transfection Reagent,該產(chǎn)品適用于將載體轉(zhuǎn)染至貼壁的HEK 293T細(xì)胞中,可提高轉(zhuǎn)染效率,增加重組慢病毒產(chǎn)量。

 

 

產(chǎn)品特點:

高性能——高達(dá)八倍的功能性滴度

操作簡便——無需更換培養(yǎng)液基 

無動物源性成分——安全可靠

 

產(chǎn)品信息

 

TransIT®-Lenti Transfection Reagent

產(chǎn)品貨號

產(chǎn)品規(guī)格

供應(yīng)商

MIR 6603

1 × 0.3 ml

Mirusbio

MIR 6604

1 × 0.75 ml

Mirusbio

MIR 6600

1 × 1.5 ml

Mirusbio

MIR 6605

5 × 1.5 ml

Mirusbio

MIR 6606

10 × 1.5 ml

Mirusbio

 

 

相關(guān)產(chǎn)品*——TransduceIT™ Transduction Reagent

 

TransduceIT™ Transduction Reagent是一款離子聚合物試劑,顯著提高靜止和分裂的哺乳動物細(xì)胞中逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)基因表達(dá)

 

 

產(chǎn)品信息

 

TransduceIT™ Transduction Reagent

產(chǎn)品貨號

產(chǎn)品規(guī)格

供應(yīng)商

MIR 6620

1 ml

Mirusbio

 

 

1. TransIT-Lenti轉(zhuǎn)染試劑具有高功能性滴度.分別使用TransIT-Lenti (3:1, vol:wt), Lipofectamine® 2000 (3:1), Lipofectamine® 3000 (3:1:1), 25 kDa PEI (6:1), CaPO4 precipitation (4 µg pDNA/well)五種試劑將MISSION®載體(pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™載體和慢病毒包裝試劑)轉(zhuǎn)染至貼壁293T/17細(xì)胞中。收集上清液,過濾(0.45 µm),用293T/17細(xì)胞滴定。慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)實驗使用了TransduceIT™8 µg/ml),轉(zhuǎn)導(dǎo)72h后使用guava easyCyte™ 5HT流式細(xì)胞儀檢測GFP表達(dá)情況。功能性滴度根據(jù)病毒的稀釋液與20% GFP陽性細(xì)胞進(jìn)行計算。

 

 

2使用TransIT-Lenti實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染. 使用TransIT®-Lenti轉(zhuǎn)染試劑 (3:1, vol:wt)MISSION®載體(pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™載體和慢病毒包裝試劑)轉(zhuǎn)染至貼壁293T/17細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染48h檢測GFP效率。圖片于轉(zhuǎn)染48h后拍自熒光顯微鏡。鏡下細(xì)胞變圓和細(xì)胞融合是由于假型化重組慢病毒VSV-G 蛋白的高表達(dá)。

 

 

 

重組慢病毒顆粒和靶細(xì)胞感染概述

 

(1) 將包括編碼目的基因、水泡性口炎G蛋白(VSV-G)和必需的病毒蛋白(例如gagpolrev)的3-4種質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至生產(chǎn)細(xì)胞(例如293T)中。

(2) 病毒從生產(chǎn)細(xì)胞漿膜出芽的方式組裝及釋放到上清液中,并以VSV-G的囊膜蛋白包裹。將含有病毒的培養(yǎng)液用0.45微米的濾器進(jìn)行過濾以除去細(xì)胞。

(3) 重組病毒顆粒轉(zhuǎn)導(dǎo)靶細(xì)胞常用陽離子聚合物來增加聚合和攝取。病毒進(jìn)入細(xì)胞后脫衣殼,將RNA基因組和病毒的酶暴露出來。病毒RNA被逆轉(zhuǎn)錄成DNA,然后整合到宿主基因組中。

(4) 轉(zhuǎn)錄和翻譯后由細(xì)胞產(chǎn)生目的基因所編碼的蛋白質(zhì)。

 

 

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